導航
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生物測定法的產生由來已久,常常用于有生物活性和生理功能的因子的測定。它常常采用一種哺乳動物細胞或者一種細菌,作為可用于觀察或測量的響應器或效應器,來對活性因子進行檢測,這也有些近似藥效學實驗。
因此,生物測定在方法學上是一種很有特點、很有用的方法。它也不限于測定某個因子,而也可以測定生物制品,如用二倍體細胞的促生長狀況來質控胎牛血清。在食品領域中,也有生物測定法,只不過是其中的一個分支,是微生物培養(yǎng)法,或微生物法,來檢測維生素,如微生物B12、葉酸、泛酸、煙酸、生物素等。
維生素也是一類活性因子,具有重要的生理作用。例如,缺少葉酸會導致胎兒神經管發(fā)育障礙。而我國的嬰幼兒配方乳品中,存在有的品牌葉酸等維生素不足的情況,因而達不到補充營養(yǎng)的效果。因此,測定食品中的維生素含量十分重要,尤其是奶制品。
微生物法測定維生素,通過添加維生素標準品或樣品中的維生素,使原先不含有這種維生素的培養(yǎng)基具有了這種營養(yǎng),從而使鼠李糖乳桿菌、萊士曼乳桿菌、植物乳桿菌等測定菌能夠不斷增殖,直到這種維生素營養(yǎng)耗盡。而檢測值可以確定試管中的菌量。需要注意的是,為了保證線性增長,需要在適當?shù)姆秶鷥冗M行標曲和測定,必要的話對樣本進行稀釋。
注意所用初始培養(yǎng)基應盡量不含痕量待測的維生素,否則會造成標曲偏移和本底過高。目前該產品只有進口的質量較為可靠,如微生物培養(yǎng)基生產商印度HiMedia公司生產的葉酸酪蛋白培養(yǎng)基和維生素B12測定用培養(yǎng)基。
總之,微生物法在生物測定法中靈敏度極高,而且操作步驟簡單,不需要特別的技巧和設備,也不需要一系列的提純步驟。即使有些類別樣品需要提取,但步驟仍然簡單,因此微生物法在生物測定法中仍然占有重要的一席之地。
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